TRIS-EDTA Antigen Retrieval Solution (50×) pH8.0

TRIS-EDTA抗原修復(fù)液（50×）pH8.0

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

EDTA抗原修復(fù)液是一種常用的抗原修復(fù)液，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類(lèi)試劑固定后的抗原修復(fù)。

細(xì)胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類(lèi)試劑固定后，組織中的許多氨基酸殘基形成醛鍵、羧甲鍵而封閉了部分抗原決定簇，同時(shí)蛋白之間發(fā)生交聯(lián)也使抗原決定簇隱蔽。導(dǎo)致免疫染色時(shí)染色信號(hào)減弱，甚至出現(xiàn)一些假陽(yáng)性染色結(jié)果。因此，對(duì)于石蠟切片，要求在進(jìn)行IHC染色前，先進(jìn)行抗原修復(fù)，即將固定時(shí)分子之間所形成的交聯(lián)破壞，恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。EDTA緩沖液是除檸檬酸緩沖液外另一種常用的IHC抗原修復(fù)液。有部分抗原用EDTA緩沖液修復(fù)效果好于檸檬酸緩沖液。特別是對(duì)于某些核抗原效果會(huì)更明顯。

本抗原修復(fù)液采用了廣泛使用的EDTA，可以有效去除醛類(lèi)固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理，而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理。抗原修復(fù)會(huì)大大改善石蠟切片的免疫染色效果，但對(duì)于冰凍切片的染色效果很多文獻(xiàn)資料表明也有顯著改善。特別是當(dāng)冰凍切片免疫染色效果欠佳時(shí)，可以考慮嘗試進(jìn)行抗原修復(fù)。從原理上來(lái)看，無(wú)論冰凍切片還是細(xì)胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類(lèi)試劑固定的樣品，進(jìn)行抗原修復(fù)都會(huì)有效去除蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。

本產(chǎn)品可以配制成5000ml抗原修復(fù)液（1×）。按照每個(gè)玻片需要10ml抗原修復(fù)液（1×）計(jì)算，本產(chǎn)品可用于500個(gè)樣本的抗原修復(fù)。

使用方法（參考）：

一．石蠟切片

      A脫蠟：

（1）浸泡在二甲苯中3次，每次3～5min，每次更換新的二甲苯。

（2）無(wú)水乙醇脫水2次，每次3～5min。

（3）95%乙醇3-5min。

（4）90%乙醇3-5min。

（5）70%乙醇3-5min。

（6）餾水沖洗兩次，每次3～5min。

B抗原修復(fù)：

（1）用去離子水或雙蒸水稀釋TRIS-EDTA抗原修復(fù)液（50×）至1×，例如1ml TRIS-EDTA抗原修復(fù)液(50×)加入49ml去離子水，混合均勻，即可得1× TRIS-EDTA抗原修復(fù)液。

（2）抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱至95℃。

（3）將切片浸泡在抗原修復(fù)液（1×）中，95-100oC加熱約20分鐘。

C冷卻至室溫后，免疫染色洗滌液洗滌1～2次，每次3～5分鐘。

D進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

二．冰凍切片

（1）用去離子水或雙蒸水稀釋TRIS-EDTA抗原修復(fù)液（50×）至1×。

（2）免疫染色洗滌液洗滌切片3～5分鐘。

（3）將切片浸泡在抗原修復(fù)液（1×）中，95℃或沸水加熱約20分鐘。

（4）抗原修復(fù)液（1×）使用前預(yù)熱至95-100℃。

（5）冷卻至室溫后，免疫染色洗滌液洗滌1～2次，每次3～5分鐘。

（6）進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

 注意事項(xiàng)：

1、  浸泡在抗原修復(fù)液（1×）中，*佳的加熱時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行實(shí)驗(yàn)。

2、  如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過(guò)多的水分蒸發(fā)。

3、  本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，

4、  為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

保存條件：

4℃保存，有效期一年。