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百螢 Annexin V-Cy5標記-------檢測細胞凋亡的探針
發布時間:2023-05-22        瀏覽次數:28        返回列表

Annexin V-Cy5標記是美國AAT Bioquest研發的用于檢測細胞功能的探針,膜聯蛋白是鈣依賴性磷脂結合蛋白家族跟著百螢一起來看看Annexin V-Cy5標記是怎么工作的吧!


1. 百螢 Annexin V-Cy5標記簡介和工作原理

細胞凋亡是細胞的基本特征之一,它在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定和一些疾病發生過程等方面起著十分重要的作用。 在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。在體內,巨噬細胞可以識別翻轉到細胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細胞清除,因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應,而在細胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應。 AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與細胞凋亡過程中翻轉到膜外的PS高親和力特異性結合。PS 外翻發生在細胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相關蛋白出現之前,這使得Annexin V 與PS 的結合成為凋亡早期的一種重要檢測標志事件。


2.百螢 Annexin V-Cy5標記參數

Ex(nm)   656

Em(nm)   670

    ~36000

         Water

存儲條件       在零下15度以下保存,避免光照

 

3.百螢 Annexin V-Cy5標記特點

方便:可用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測;

快速:1小時內即可完成實驗;

準確:能準確區分活細胞、凋亡細胞和壞死細胞,并計數各群細胞的比例。

4.百螢 Annexin V-Cy5標記數據分析

      下圖是使用流式細胞儀檢測膜聯蛋白V-mFluor Violet 450與磷脂酰絲氨酸在Jurkat細胞凋亡中的結合活性的實例。 在活的非凋亡細胞中,膜聯蛋白V-mFluor Violet 450檢測非誘導細胞中的先天性細胞凋亡,其通常為所有細胞的2-6%。 在凋亡細胞中,膜聯蛋白V-mFluor Violet 450與磷脂酰絲氨酸結合,磷脂酰絲氨酸位于細胞膜的外部小葉上,導致染色強度增加。


5.百螢 Annexin V-Cy5標記參考文獻

Resources-Application Notes Phenotypic and Epigenetic Mechanism of Action Determinations of Histone Methylase and Demethylase Inhibitors using Digital Widefield Microscopy
Authors: Brad Larson, Peter Banks
Journal: Experimental Biology (2017)

Targeted Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia produces lysosomal reactive oxygen species and causes Caspase-1 dependent cell death
Authors: Pascal Clerc, Pauline Jeanjean, Nicolas Halalli, Michel Gougeon, Bernard Pipy, Julian Carrey, Daniel Fourmy, Véronique Gigoux
Journal: Journal of Controlled Release (2017)

 

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